IND申报药理毒理所需试验清单

01 前言

药物研发进程中，非临床药理毒理评价是评估候选化合物安全性的基石，为首次人体试验（FIH）提供至关重要的科学依据。该评价体系需遵循《药物非临床研究质量管理规范》（GLP），其核心在于系统揭示药物的吸收、分布、代谢、排泄（ADME）特性及潜在毒性风险。不同类型药物的研究策略虽有差异，但核心评价框架保持一致。

临床前药理毒理评价有哪些内容？

• 《药物非临床研究质量管理规范》（国家食品药品监督管理总局令第34号） 指出非临床安全性评价研究，指为评价药物安全性，在实验室条件下用实验系统进行的试验，包括：安全药理学试验、单次给药毒性试验、重复给药毒性试验、生殖毒性试验、遗传毒性试验、致癌性试验、局部毒性试验、免疫原性试验、依赖性试验、毒代动力学试验以及与评价药物安全性有关的其他试验。

单次给药毒性试验(急性毒性）

目的：明确单次或24小时内多次给药后产生的急性毒性反应特征及其可逆性，识别主要毒性靶器官。  

意义：为重复给药毒性试验的剂量设计、临床起始剂量选择及急性中毒风险评估提供关键参考。

实验设计：需采用两种相关动物种属（特定情况如部分中药可用一种）、两种性别、健康成年动物。剂量设计方法多样（如最大耐受量法、固定剂量法、上下法等）。观察期通常不少于14天，密切监测临床症状、死亡、体重变化，终末进行大体解剖和组织病理学检查。

结果分析与评价：反应（时间、程度），剂量-反应关系，初步判断靶器官MFD、MTD、LD50。

《药物单次给药毒性研究技术指导原则》，CDE，NMPA，2014年.

重复给药毒性试验(长期毒性）

目的：全面描述动物长期重复暴露于受试物后的毒性反应谱，确定毒性靶器官、剂量依赖性和时间进程。

意义：预测临床不良反应、毒性靶器官、未观察到有害作用水平（NOAEL）、推测FIH和安全剂量范围。

实验设计：要求两种相关种属、两种性别动物。设置低（通常接近或略高于预期有效暴露量）、中、高（应能诱导明显毒性反应）剂量组及溶剂对照组。给药频率通常每日一次，试验周期需覆盖并支持拟开展临床研究的期限。监测指标全面，包括行为学、摄食量、体重、眼科、体温、心电图（ECG）、临床病理学（血液学、血生化、尿液分析）及详尽的组织病理学检查。

结果分析与评价：正确理解数据意义(均值/个体)，正确判断毒性(剂量-反应关系/组内/性别差异)；动物与人毒性反应差异；综合评价(药学、药效、药代、其他毒理学结果)。

《药物重复给药毒性研究技术指导原则》，CDE，NMPA，2014年.

遗传毒性试验

目的：检测DNA损伤及其损伤的固定，评估潜在的致突变和致癌风险。  

适用范围：中药、天然药物、化学药物。  

实验设计：通常采用以下组合之一：

标准组合试验(一)：细菌回复突变试验（Ames试验） + 体外哺乳动物细胞遗传损伤试验（如染色体畸变试验、微核试验） + 一项体内遗传毒性试验（通常为啮齿类骨髓微核试验）；  

标准组合试验(二)：Ames试验 + 两项使用不同组织的体内遗传毒性试验（如骨髓微核试验 + 肝脏彗星试验。

结果分析与评价：综合判断受试物是否具有遗传毒性潜力。

《S2（R1）:人用药物遗传毒性试验和结果分析指导原则》，CDE，NMPA，2019年.

生殖毒性

目的：预测其药物可能产生的对生殖细胞、受孕、妊娠、分娩、哺乳等亲代生殖机能的不良影响，以及对子代胚胎-胎儿发育、出生后发育的不良影响。  

意义：是药物非临床安全性评价的重要内容，是药物进入临床研究及上市的重要环节，对临床用药人群（尤其是育龄人群）的风险管理至关重要。

适用范围：所有药物，包括生物制品、用于传染性疾病的疫苗等。  

不适用于：细胞治疗、基因治疗和组织工程产品。  

试验安排：S5(R3)、ICH M3、ICH S6和ICH S9

评估范畴：完整生命周期(交配受孕、着床、硬腭闭合、妊娠结束、离乳、性成熟）；Ⅰ段、Ⅱ段、Ⅲ段。毒代动力学（TK)：妊娠动物、胚胎或胎仔、乳汁。

安全药理学

目的：识别药物在治疗剂量及以上范围内，对生理功能（特别是生命体征相关系统）产生的非预期药效学作用（不良反应）。  

适用范围：所有药物，包括生物制品。 

评价系统：重点关注中枢神经系统（FOB）、心血管系统（清醒动物血压、心率、ECG，体外hERG）和呼吸系统（频率、潮气量等）的功能评价  

实验设计：通常在清醒动物上进行，单次给药，剂量需涵盖并超出治疗剂量范围以达到充分暴露。根据核心组合结果或化合物特性，可能需进行追加或补充试验（如对泌尿、胃肠系统的影响）。  

《S7A:人用药品安全药理学试验指导原则》，CDE，NMPA，2019年. 

致癌性试验 

目的：识别受试物在动物中的潜在致癌性，并评估其对人体的相关风险。

实施情况：通常基于长期用药（≥6个月或频繁间歇性长期使用）、特定担忧因素（如阳性遗传毒性结果、明确免疫抑制或激素活性、特定患者人群、高全身暴露、结构警示、光致癌潜力等）进行评估。

危险因素：免疫抑制作用、激素活性  

试验系统：大鼠首选，致癌模型动物，通常需第二种啮齿类（小鼠）。  

潜在致癌性评价：评估肿瘤发生率、类型、潜伏期、剂量-反应关系，并与人体药代动力学特征进行关联性分析，判断人体风险。

《S1A：药物致癌性试验必要性指导原则》,《S1B：药物致癌性试验》 CDE，NMPA，2019年. 

局部毒性试验

目的：评估非口服给药途径（如注射、皮肤、粘膜、眼、吸入等）对用药局部组织产生的刺激性、腐蚀性、过敏性反应，以及对全身产生的过敏性、溶血性等不良反应。

关键内容：局部刺激性/过敏性试验、全身过敏性试验、溶血性试验。

关键产出：明确给药途径相关的局部和全身安全性风险。

《药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》，CDE，NMPA，2014年.

免疫原性试验 

目的：评估治疗性蛋白、多肽及其衍生物（如抗体偶联药物ADC）诱发抗药抗体（ADA）的能力及其潜在后果（如中和活性、过敏反应、影响药效/清除）。

表现形式：中和药物活性，交叉免疫反应，过敏反应，细胞因子释放综合征。

研究内容：聚焦在抗药抗体的检测和表征，发生率、滴度、存续时间和中和能力。

检测策略：多层级分析(筛选，确证，滴度，中和活性) 

分析方法：直接法、桥联法、均相结合法

《药物免疫原性研究技术指导原则》，CDE，NMPA，2021年.

依赖性试验

目的：评估药物产生精神依赖（渴求）和躯体依赖（戒断症状）的潜力，警示潜在滥用倾向。  

适用范围：主要针对作用于中枢神经系统（CNS）的药物。 

评估策略：早期评估（结构分析、靶点预测、PK特性）结合依赖性行为学试验（药物辨别、自身给药、戒断评价），常用大鼠模型。  

依赖性潜力早期评估：化学结构、相关靶点、可通过血脑屏障  

早期评估试验：受体-配体结合试验、药代动力学、药理和毒理学   

试验系统：常用大鼠、两种性别；最高治疗剂量Cmax；阳性和阴性对照；Tmax时检测行为学

《药物非临床依赖性研究技术指导原则 》，CDE，NMPA，2022年.

毒代动力学

目的：在毒性试验中同步测定受试物在动物体内的全身暴露水平（AUC, Cmax等）及其持续时间，建立暴露量与毒性效应的关系。

意义：解释毒性反应、支持种属选择合理性、优化给药方案、量化靶器官暴露、桥接动物与人体安全性（为FIH剂量选择提供依据）、指导临床安全监测。 

实施：通常伴随毒性试验，暴露量评估、毒代动力学参数(AUC0-T、Cmax、C(time) )、给药方案按长毒、样本采集、分析方法、数据统计与评价、报告(自身评价/毒性反应解释)。

《药物毒代动力学研究技术指导原则》，CDE，NMPA，2014年. 

支持IND申报所需的试验

支持IND申报的关键非临床研究概览

为成功提交IND申请，需整合并提供以下关键非临床研究数据：

• 药理学：体内外主要药效学（作用机制验证、概念验证POC）。

• 分析学：经过验证的药物制剂分析方法和生物样品分析方法。

• 药代动力学：全面的体内ADME研究及体外代谢/相互作用研究。

• 毒理学（安全性评价核心）：

- 安全药理学（核心组合：CNS、心血管、呼吸系统）。

- 一般毒性试验：剂量范围探索试验（DRF）及符合GLP规范的单次和重复给药毒性试验（试验期限不短于拟开展的临床研究给药期）。

- 遗传毒性试验（标准核心组合）。

- 根据药物特性和临床计划，可能需要的其他试验（生殖毒性早期试验、局部耐受性、免疫原性、依赖性潜力初步评估等）。

• 制剂安全性：根据给药途径和制剂类型，完成相应的局部耐受性/刺激性/过敏性等试验。

总结

非临床药理毒理评价是一个系统、严谨且高度法规化的过程。通过精心设计和执行上述关键研究，旨在全面阐明候选药物的安全性特征，识别潜在风险点（毒性靶器官、安全范围、特殊毒性如遗传、生殖、致癌、依赖风险等），并利用毒代动力学数据建立动物与人体暴露关联，为首次人体临床试验的安全启动奠定坚实的科学基础，最终保障受试者安全。各项研究的具体实施需严格遵循国内外相关技术指导原则的要求。

试验清单